Resumo da Bibliografia Portuguesa- Engenharia Genética

Resumo da Bibliografia Portuguesa- Engenharia Genética
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Resumo Manuscrito de toda a Bibliografia portuguesa de Engenharia Genética, com destaque para matéria que calha sempre em avaliaçoes! + Apontamentos da Liçao nº5 e nº6

Índice

Do DNA à proteína
  • Proteínas; 
  • Aminoácidos; 
  • Classes de RNA; 
  • Transcriçao;
  • Transcriçao- procariotas; 
  • Transcriçao- eucariotas; 
  • Traduçao; 
  • Mutaçoes; 
  • Iniciaçao-Procariotas; 
  • Iniciaçao- eucariotas; 
  • Elongaçao e traduçao; 
  • Regulaçao da expressao genética; 
  • Regulaçao em procariotas; 
  • Regulaçao negativa de operoes indutiveis; 
  • Regulaçao negativa dos operoes repressiveis (procariotas); 
  • Regulaçao positiva (procariotas); 
  • Regulaçao em eucariotas- por mRNA; 
  • Enhancers e Silencers; 
  • Regulaçao em eucaiotas- por RNAi; 
  • Enzima Dicer; 
  • Distribuiçao celular de proteinas; 
  • Traduçao

Clonagem de genes
  • Processo de clonagem; 
  • Enzimas para clonagem: 
    • T4 DNA ligase; 
    • DNAse I; 
    • DNA polimerase I; 
    • Klenow; 
    • RNA polimerases; 
    • Transcritase Reversa; 
    • Exonuclease III; 
    • Nuclease SI; 
    • Fosfatase Alcalina; 
    • Cinase de Polinucleótidos; 
  • Enzimas de restrinçao: 
    • Enzima EcoR I
    • Enzima Pst I; 
    • Enzima PVU II; 
    • Enzimas Sal I e XHO I;
  • Exemplo típio de clonagem; 
  • Plasmídeos- Vetor bacteriano; 
  • Plasmídeo recombinante- exemplo; 

Vetores de clonagem

  • Vetores Shuttle; 
  • Plasmídeos;
  • Bacteriofagos ou fagos; 
  • Tiplos de fagos de clonagem; 
  • Vantagens dos fagos; 
  • Fagos de inserçao; 
  • Fagos de substituiçao; 
  • Fago do tipo selvagem; 
  • Fago recombinante; 
  • Cósmidos; 
  • Cromossomas artificias; 

 

Vetores de expressao in vivo
  • sistemas de expressao; 
  • E.coli; 
  • Eucariotas; 
  • Procariotas-vetores de expressao in vivo; 
  • Plasmídeos; 
  • Expressao controlada; 
  • Expressao direta; 
  • Sobre-expressao; 
  • Proteinas de fusao; 
  • Caudas Tags;
  • Eucariotas- vetores de expressao in vivo; 
  • Vetores shuttle; 
  • Baculovírus recombinantes; 
  • Culturas de células de mamíferos

Metodologias de análise de genes e seus produtos

  • Eletroforese de DNA em gel de agarose; 
  • Brometo de etídio; 
  • Gel de Acrilamida; 
  • Eletroforese Pulsed-field; 
  • Mapas de restrinçao de DNA; 
  • Southern Blot; 
  • Footprinting; 
  • Retardaçao em Gel; 
  • Northern Blot; 
  • Mapeamento com Nuclease SI e Extensao de Primer; 
  • Western Blot; 
  • Transcriçao/ Traduçao in vitro; 
  • Imunoprecipitaçao; 
  • Anticorpos; 
  • Sequenciaçao de DNA; 
  • Método de Sanger/ Método de terminaçao de cadeias; 
  • Preparaçao de fragmentos de DNA para sequenciaçao; 
  • Sequenciaçao Shutgun

Reação em cadeia da Polimerase (PCR)
  • PCR; 
  • Reaçao de PCR; 
  • Problemas do PCR; 
  • Taq Polimerase; 
  • Utilizaçoes; 
  • Primers; 
  • Enzimas de Restrinçao; 
  • Plasmídeo; 
  • PCR Quantitativa/ PCR em tempo Real; 
  • Reverse Transcription-PCR (RT-PCR)

Biblioteca de Genes
  • Biblioteca de genes; 
  • Tipos de bibliotecas: biblioteca genomica e biblioteca de cDNA; 
  • Construçao de Bibliotecas genómicas; 
  • Construçao de Bibliotecas de cDNA; 
  • Adiçao de adaptadores; 
  • Rastreio de Bibliotecas para isolamento de genes específicos: 
    • Por hibridaçao; 
    • Por expressao; 
    • Por complementaçao; 
    • Por clonagem posicional 
    • Marcador genético; 
  • Do gene à proteína e da proteina ao gene: 
    • Genética reversa

Apontamentos Lição nº5 e nº6
  • Métodos para introduzir o DNA nas células hospedeiras: 
    • Transformaçao química e eletroporaçao; 
    • Eletrotransformaçao; 
    • Transfeçao; 
    • Empacotamento in vitro de DNA de fagos; 
    • Microinjeçao; 
    • Biobalística; 
  • Construçao de Bancos/ Bibliotecas de DNA
    • Bibliotecas; 
    • Tipos de Bibliotecas: Bancos de cDNA e Bancos genómicos; 
    • Fagos de inserçao; 
    • Adaptadores/ Linkers; 
    • Homopolímeros;
  • Preparaçao dos fragmetnos de DNA para clonagem

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